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露天和不同林分栽培多花黄精产量和品质特征分析

洪震, 张文霞, 兰志勇, 宫福雨, 江建铭, 孙健, 王志安, 刘跃钧

洪震, 张文霞, 兰志勇, 宫福雨, 江建铭, 孙健, 王志安, 刘跃钧. 露天和不同林分栽培多花黄精产量和品质特征分析[J]. 浙江林业科技, 2024, 44(4): 35-42. DOI: 10.3969/j.issn.1001-3776.2024.04.006
引用本文: 洪震, 张文霞, 兰志勇, 宫福雨, 江建铭, 孙健, 王志安, 刘跃钧. 露天和不同林分栽培多花黄精产量和品质特征分析[J]. 浙江林业科技, 2024, 44(4): 35-42. DOI: 10.3969/j.issn.1001-3776.2024.04.006
HONG Zhen, ZHANG Wenxia, LAN Zhiyong, GONG Fuyu, JIANG Jianming, SUN Jian, WANG Zhi’an, LIU Yuejun. Yield and Quality of Different Aged Rhizome of Polygonatum cyrtonema under Different Forest with Different Crown Density[J]. Journal of Zhejiang Forestry Science and Technology, 2024, 44(4): 35-42. DOI: 10.3969/j.issn.1001-3776.2024.04.006
Citation: HONG Zhen, ZHANG Wenxia, LAN Zhiyong, GONG Fuyu, JIANG Jianming, SUN Jian, WANG Zhi’an, LIU Yuejun. Yield and Quality of Different Aged Rhizome of Polygonatum cyrtonema under Different Forest with Different Crown Density[J]. Journal of Zhejiang Forestry Science and Technology, 2024, 44(4): 35-42. DOI: 10.3969/j.issn.1001-3776.2024.04.006

露天和不同林分栽培多花黄精产量和品质特征分析

基金项目: 华东药用植物园科研管理中心研发计划项目(2020YZY02);丽水市重点研发计划项目(2022ZDYF15);财政部和农业农村部:国家现代农业产业技术体系资助(CARS-21);浙江省特色中药资源保护与创新利用重点实验室(2021E10013)
详细信息
    作者简介:

    洪震,高级工程师,从事乡土植物开发与利用研究;E-mail: 452451651@qq.com

    通讯作者:

    刘跃钧,正高级工程师,从事中药材栽培利用研究;E-mail: lslyj66@163.com

  • 中图分类号: R284.1;S567.23

Yield and Quality of Different Aged Rhizome of Polygonatum cyrtonema under Different Forest with Different Crown Density

  • 摘要:

    目的:系统分析露天和不同林分栽培的多花黄精产量特征、活性成分含量和抗氧化特征,为不同栽培模式下黄精的区分应用提供参考。方法:以多花黄精新品种‘丽精1号’Polygonatum cyrtonema ‘Lijing No. 1’为实验材料,在浙江省松阳县和景宁县两地,选择土壤类型和肥力水平相近的山田地栽培,郁闭度不同的毛竹林、杉木林、香榧林套作栽培。在相同的栽培管理条件下,测量不同栽培处理多花黄精根茎的表型和产量特征;测定不同处理材料的浸出物、多糖、总皂苷、总酚、总黄酮含量;应用DPPH法、ABTS法和FRAP法测定不同处理材料的体外抗氧化活性。结果:郁闭度是影响多花黄精产量的关键因素,本研究中当郁闭度为50%时,林下栽培4年生多花黄精单株干质量可超过100 g,其产量与露天栽培组无显著差异;郁闭度70%林分栽培的多花黄精产量较露天栽培组显著下降。多花黄精栽培第4年增产显著,不同栽培条件下4年生较3年生组根茎同比增产达150%以上。在露天和低郁闭度(50%)下栽培的多花黄精根茎浸出物和多糖含量均显著升高;高郁闭度(≥70%)下栽培的多花黄精根茎总皂苷、总酚和总黄酮含量相对较高,同时抗氧化能力显著升高。结论:在同等肥力和种源前提下,郁闭度对黄精产量和品质影响最为显著,低郁闭度(50%)栽培的黄精产量与露天栽培无显著差异,多糖和浸出物积累充足;高郁闭度(≥70%)栽培的黄精产量显著下降,但其所产药材总皂苷、总黄酮和总酚含量相对升高,同时抗氧化活性也显著升高。建议以实际生产中林分郁闭度情况作为黄精区分应用的重要参考。

    Abstract:

    In November 2018 and 2019, rhizomes of Polygonatum cyrtonema ‘Lijing No. 1’ were planted open air, under different canopy density of Phyllostachys edulis forest, Cunninghamia lanceolata stand and Torreya grandis ‘Merrillii’ seedling stand with similar site condition in Songyang and Jingning, Zhejiang province. In November 2022, rhizomes were harvested for determination of phenotypes and yield. The polysaccharides, saponins, phenols and flavonoids were measured, and antioxidant activities were assessed by DPPH, ABTS and FRAP. The result demonstrated that crown density was the most important factor affecting the yield of rhizome. The dry weight of single 4-year plant under forest with 50% of crown density could reached 100 g, which had no significant difference of that in open-air ones. The yield of P. cyrtonema cultivated under forest with 50% of crown density decreased significantly compared with that in open-air ones. The yield of 4-year P. cyrtonema under different cultivation site increased 150% more than that of 3-year ones. The contents of extract and polysaccharide from P. cyrtonema cultivated under forest with lower than 50% of crown density and open air increased significantly. The contents of total saponins, total phenols and total flavonoids from P. cyrtonema cultivated forest with more than 70% of crown density were higher, and the antioxidant capacity was significantly increased.

  • 黄精为百合科Liliaceae黄精属Poligonatum滇黄精P. kingianum、黄精P. sibiricum或多花黄精P. cyrtonema的干燥根茎,具有补气养阴,健脾,润肺,益肾等功效[1]。黄精是我国传统大宗名贵药食两用的中药材,含有多糖、皂苷、酚酸、黄酮等活性成分。现代药理研究表明,黄精具有免疫调节、延缓衰老、抗运动疲劳、抗肿瘤、降血糖、保护心血管、保护中枢神经系统、抗病原微生物等作用,同时在功能食品、保健化妆品方面也有较好的开发利用前景[2-4]

    近年来,一系列国家政策对中药材的生态栽培提出具体要求。2019年中共中央、国务院《关于促进中医药传承创新发展的意见》中指出“推进中药材生态种植、野生抚育和仿生栽培”;2021年国务院印发《“十四五”中医药发展规划》要求“集成推广中药标准化种植模式,开展适宜品种林下种植示范研究,形成生态种植技术体系”;2023年国务院办公厅《中医药振兴发展重大工程实施方案》提出“广泛开展中药材生态种植、野生抚育和仿野生栽培”。黄精耐阴,可以林下栽培,也可以山间田地栽培,其中山地林下栽培黄精不与主粮争地,有效利用林地增加了山地的复种指数及农民的收入,这种生态栽培模式不仅积极响应了中央政策,同时还原了其原生生态环境,将成为未来中药材黄精的重要种植模式[5]。而当前栽培黄精产量和品质的良莠不齐,严重影响了黄精品质控制和经济效益,成为限制黄精产业发展的主要因素。已有研究表明植被群落、光照强度影响黄精产量;产地、生长年限、立竹密度、坡位等因素影响黄精品质[6-10]。目前的研究多为已有生产基地的被动数据采集,多因素混合分析,不能精准地反映单因素对于黄精品质和产量的影响。在浙江山区,多花黄精为黄精的主要生产用基原植物,本研究以多花黄精新品种‘丽精1号’Polygonatum cyrtonema ‘Lijing No. 1’为实验材料,在统一的栽培管理条件下选择土壤类型和肥力近似的地块,分析露天栽培,不同林分、不同郁闭度下多花黄精的产量增殖特征,同时测定了主要活性成分和抗氧化特征,系统对比分析非遗传因素对于山地栽培多花黄精产量和品质的影响,以期为高产优质多花黄精生态栽培和差异化应用提供参考依据。

    试验所用材料为多花黄精品种‘丽精1号’,来源于浙江省的松阳县和景宁县两地。2018年11月和2019年11月,以根茎为繁殖材料定植,所用根茎规格为2~3节,带有2~3个饱满芽,重量为30~40 g,统一栽培管理。于2022年11月每个实验处理按“五点法”随机采集5个单株样品并编号。采后样品立即洗净、去掉须根、称重,计数新生芽和枝条剥落痕个数等表型数据;切厚片,60 ℃烘干过夜至恒质量,粉碎,过3号筛,4 ℃储藏备用。实验田地为山间田地;林分包括毛竹Phyllostachys edulis林和杉木Cunninghamia lanceolata林,其所在山地坡度15~20°,坡向为东或南;香榧Torreya grandis cv. Merrillii幼树间作的多花黄精无遮阴效果,其郁闭度为零;栽培地点详细信息见表1

    表  1  黄精样品信息
    Table  1.  Location of sample plots
    编号 样品名称 样品详情 郁闭度/% 经度/E 纬度/N 海拔/m
    1 3-SY-TD 0 松阳-田地-3年 0 119°32′19″ 27°49′49″ 788
    2 4-SY-TD 0 松阳-田地-4年 0
    3 3-SY-ZL 0.7 松阳-毛竹林-3年 70 118°29′6″ 28°21′57″ 447
    4 4-SY-ZL-0.7 松阳-毛竹林-4年 70
    5 3-SY-SM 0.5 松阳-杉木-3年 50 119°34′13.41″ 28°31′49.47″ 903
    6 4-SY-SM 0.5 松阳-杉木-4年 50
    7 4-SY-SM 0.7 松阳-杉木-4年 70
    8 4-JN-TD 0 景宁-田地- 4年 0 119°32′21.7032 27°48′49.572″ 820
    9 4-JN-XF 0 景宁-香榧- 4年 0 119°42′7.4″ 27°49′39.57″ 998
    10 4-JN-ZL 0.7 景宁-竹林- 4年 70 119°39′34.54″ 27°49′22.8″ 820
    11 4-JN-ZL 0.9 景宁-竹林- 4年 90
      注:数字“3、4”代表栽培年限,SY为松阳,JN为景宁;TD为田地,ZL为竹林,SM为杉木,XF为香榧。下同。
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    葡萄糖标准品(批号P-012-180222,HPLC≥98%,成都瑞芬思生物科技有限公司),芦丁对照品(批号19010202,UV≥98%);没食子酸对照品(批号18032801,HPLC≥99.04%),均购于中国科学院成都生物研究所。人参皂苷Rb1对照品(批号129K024,HPLC≥98%,北京索莱宝科技有限公司),Trolox(6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethyl-chromane-2-carboxylic acid)、DPPH(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl):美国Sigma公司; ABTS(2,2-azino-bis-3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid):北京Solarbio公司;TPTZ(2,4,6-tris-2,4,6-tripiridyl-2-triazine),合肥巴斯夫生物科技有限公司。蒽酮、香草醛、碳酸钠、氯化铝、高氯酸、福林酚、甲醇等试剂均为国产分析纯。

    按《中国药典》[1]第一部中相关方法测定黄精样品浸出物和多糖含量。其中浸出物以稀乙醇-热浸法测定,黄精多糖以葡萄糖为对照品,蒽酮-硫酸法测定,得回归方程为Y=41.57x+0.018 4,R2=0.9995,在0.004 04~0.036 36 mg·mL−1范围内线性关系良好。

    按相关文献中方法测定总皂苷含量[10]。以人参皂苷Rb1为对照品,香草醛-冰醋酸法显色测定,得回归方程为Y=9.610 2x+0.053 5,R2=0.999 7,在0.008 4~0.067 5 mg·mL−1范围内线性关系良好。

    按相关文献中方法测定总酚含量[11]。以没食子酸为对照品,福林酚法显色测定,得回归方程为Y=0.054 3x+0.051 5,R2=0.998 1,在0.001 61~0.009 66 mg·mL−1范围内线性关系良好。

    按相关文献中方法测定总黄酮含量[12]。以芦丁为对照品,三氯化铝显色法测定,得回归方程为Y=12.982x0.1699R2=0.9952,在0.019 3~0.192 8 mg·mL−1范围内线性关系良好。

    按相关文献中方法分别采用DPPH法[13]、ABTS法和FRAP法[14]测定黄精样品体外抗氧化活性。DPPH法以Trolox(水溶性维生素E)为对照品,得回归方程为Y=6.613 3x+28.001,R2=0.9985,清除率在36.23%~96.35%内呈现良好的线性关系;结果以每克干样品的Trolox当量(mmol)表示。ABTS法以Trolox为对照品,得回归方程为Y=4.414 3x+10.919,R2=0.999 5,清除率在15.89%~93.18%内呈现良好的线性关系;结果以每克干样品的Trolox当量(mmol)表示。FRAP法以硫酸亚铁为对照品,得回归方程为Y=0.011 6x+0.076 2,R2=1,在0.002 5~0.075 0 mg·mL−1范围内线性关系良好;结果以每克干样品的亚铁离子当量(mmol)表示。

    采用SPSS 25.0统计软件对测定的数据进行整理分析,采用单因素方差分析比较不同处理间数据差异,利用Pearson相关性分析方法分析各检测指标间的相关性。

    对露天和不同郁闭度、不同林分下栽培的4年生多花黄精产量特征进行分析,结果显示,相比露天栽培,遮阴处理使多花黄精产量显著降低(P<0.05)。露天组和低郁闭度(50%)杉木林下栽培4年生多花黄精单株干质量可达到100 g以上,且无显著差异;中郁闭度(70%)下以杉木林下栽培多花黄精单株干质量高于竹林下栽培,但无显著差异;高郁闭度(90%)下多花黄精单株干质量显著降低(P<0.05)(表2)。遮阴处理后多花黄精地下根茎的表型也产生与产量对应的差异:露天栽培黄精新生芽个数和鲜、干质量显著高于不同郁闭度林下栽培(P<0.05),随着郁闭度增加剥落痕个数无显著差异,新生芽个数、鲜质量、干质量和折干率整体均呈显著下降趋势。这可能是多花黄精适应弱光环境的策略,在光照匮乏的情况下向地上部分分配更多的光合产物以促进茎叶的生长,从而获得更多的光能满足其生长,而根茎中的光合产物含量下降,根茎质量和折干率随之降低[15]

    表  2  不同郁闭度、不同林分栽培黄精根茎表型和产量特征差异分析($\overline {\mathrm{x}} $±s,n=5)
    Table  2.  Phenotype and yield of P. cyrtonema rhizome cultivated under different forest with different crown density
    组别 样品编号 新生芽/个 剥落痕/个 鲜质量/g 干质量/g 折干率/%
    露天组 4-SY-TD 0 10.25±2.06a 9.00±2.31a 498.00±34.13ab 110.97±4.36ab 22.32±0.69b
    4-JN-TD 0 10.75±1.50a 8.00±2.83ab 611.63±190.30a 138.28±45.61a 22.52±0.66ab
    4-JN-XF 0 8.50±3.11ab 7.00±0.82ab 600.50±71.39a 137.77±21.89a 22.90±2.05ab
    低郁闭度 4-SY-SM 0.5 6.50±1.00bc 7.00±0.82ab 459.50±43.09bc 112.52±12.06ab 24.47±0.46a
    中郁闭度 4-SY-SM 0.7 5.25±0.96cd 6.75±0.96ab 394.50±44.72bc 87.10±12.02bc 22.13±2.17b
    4-SY-ZL 0.7 3.75±0.96d 5.75±0.96b 370.75±50.72bc 82.36±12.73bc 22.19±1.12b
    4-JN-ZL 0.7 3.50±0.58d 7.50±1.91ab 381.25±62.37bc 83.92±14.01bc 22.02±0.83b
    高郁闭度 4-JN-ZL 0.9 3.50±0.58d 7.75±2.06ab 356.00±66.85c 59.47±9.97c 16.81±1.29c
      注:同列不同小写字母代表数据间显著性差异(P<0.05)。下同。
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    对露天、相同林分及郁闭度下栽培的3年和4年生多花黄精根茎表型和产量特征进行分析,结果显示,栽培第4年多花黄精产量显著提高(P<0.05)。4年生长周期较3年生长周期的多花黄精单株干质量同比增加1.52~2.33倍,以林下栽培处理的提升幅度更大,且有显著差异(P<0.05),低郁闭度(50%)下提升幅度高于中郁闭度(70%),但差异不显著;不同郁闭度下折干率均显著提升(P<0.05)。相同栽培年限下,露天和低郁闭度(50%)下多花黄精单株干质量无显著差异,中郁闭度(70%)下新生芽个数,单株鲜质量、干质量均显著降低(P<0.05)(表3)。

    表  3  不同年份栽培黄精根茎表型和产量特征差异分析($\overline {\mathrm{x}} $±s,n=5)
    Table  3.  Phenotype and yield of different aged P. cyrtonema rhizome cultivated under different forest with different crown density
    组分 样品编号 新生芽/个 剥落痕/个 鲜质量/g 干质量/g 同比增加/% 折干率/%
    露天组 3-SY-TD 8.75±1.50a 8.50±0.58ab 219.38±22.48c 44.00±3.33c 20.11±0.78c
    4-SY-TD 10.25±2.06a 9.00±2.31a 498.00±34.13a 110.97±4.36a 152.20 22.32±0.69b
    低郁闭度
    杉木林组
    3-SY-SM 0.5 3.25±0.50c 5.00±1.41c 148.00±14.04d 33.76±4.35cd 22.77±1.10b
    4-SY-SM 0.5 6.50±1.00b 7.00±0.82abc 459.50±43.09a 112.52±12.06a 233.31 24.47±0.46a
    中郁闭度
    竹林组
    3-SY-ZL 0.7 2.50±0.58c 6.75±0.96bc 133.75±24.13d 27.39±4.10d 20.60±1.68c
    4-SY-ZL 0.7 3.75±0.96c 5.75±0.96c 370.75±50.72b 82.36±12.73b 200.70 22.19±1.12b
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    表4所示,露天组以香榧幼苗林下栽培组浸出物和活性成分含量最高,该现象可能与高海拔、强辐射等小气候因素相关。低郁闭度组(50%)浸出物含量显著增加,其它活性成分含量均显著下降;当郁闭度>50%时,随郁闭度增加浸出物含量显著下降,多糖和总皂苷整体呈先升后降的变化趋势,总酚和总黄酮则随郁闭度增加而显著上升,以总酚上升幅度最大,高郁闭度下样品总酚含量约为低郁闭度的3.36倍。

    表  4  不同郁闭度、不同林分栽培黄精根茎活性成分含量差异分析($\overline {\mathrm{x}} $±s,n=5)
    Table  4.  Analysis of differences of active constituent content in rhizome of P. cyrtonema cultivated under different forest with different crown density
    组别 样品编号 浸出物/% 多糖/% 总皂苷/(mg·g−1) 总酚/(mg·g−1) 总黄酮/(mg·g−1)
    露天组 4-SY-TD 0 80.83±2.19c 13.18±0.31c 55.34±0.18cd 0.94±0.17c 0.18±0.05d
    4-JN-TD 0 77.46±0.46d 13.63±0.32c 49.50±0.66d 0.95±0.36c 0.23±0.03cd
    4-JN-XF 0 82.43±2.29bc 11.39±0.23c 100.32±13.17a 1.19±0.02b 0.28±0.06c
    低郁闭度 4-SY-SM 0.5 83.00±1.47ab 12.31±0.04b 48.61±0.52d 0.94±0.02c 0.23±0.01cd
    中郁闭度 4-SY-SM 0.7 78.54±0.71d 14.12±0.24b 50.75±5.27d 1.22±0.02b 0.27±0.06c
    4-SY-ZL 0.7 84.89±1.05a 14.85±0.64a 44.70±1.60d 0.90±0.07c 0.24±0.01c
    4-JN-ZL 0.7 77.32±3.28d 13.18±0.31c 75.07±1.66b 1.19±0.30b 0.40±0.02b
    高郁闭度 4-JN-ZL 0.9 72.30±1.25f 13.63±0.32c 66.24±7.79bc 2.84±0.06a 0.49±0.05a
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    表5所示,林下栽培的4年生黄精较3年样品浸出物和多糖含量均显著增加,露天栽培的不同生长年限的浸出物和多糖含量差异不显著。随着生长年限增加,露天栽培黄精总皂苷显著上升,总酚和总黄酮含量显著下降;而林下栽培黄精总皂苷和总酚含量显著下降,总黄酮含量变化不显著。

    表  5  不同年份栽培黄精根茎活性成分含量差异分析($\overline {\mathrm{x}} $±s,n=5)
    Table  5.  Active constituent content in different aged rhizome of P. cyrtonema cultivated under different forest with different crown density
    组别 样品编号 浸出物/% 多糖/% 总皂苷/(mg·g−1) 总酚/(mg·g−1) 总黄酮/(mg·g−1)
    露天组 3-SY-TD 0 79.66±3.69c 13.18±0.31c 44.27±0.42c 1.10±0.04a 0.24±0.06a
    4-SY-TD 0 80.83±2.19bc 13.63±0.32c 55.34±0.18a 0.94±0.17b 0.18±0.05b
    低郁闭度杉木林组 3-SY-SM 0.5 79.34±1.90c 13.39±0.23c 55.88±2.62a 0.94±0.01b 0.20±0.03ab
    4-SY-SM 0.5 83.00±1.47ab 14.32±0.05b 48.61±0.52b 0.94±0.02b 0.23±0.01a
    中郁闭度竹林组 3-SY-ZL 0.7 83.50±0.44ab 14.12±0.24b 47.77±1.14b 0.91±0.01b 0.24±0.01a
      4-SY-ZL 0.7 84.89±1.05a 14.85±0.64a 44.70±1.60c 0.90±0.07b 0.24±0.01a
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    三种方法下抗氧化活性变化趋势一致,表明对体外抗氧化活性的检测结果可信度较高(见图1A)。抗氧化活性随郁闭度增加呈先下降后上升的变化趋势,有显著差异,尤以高郁闭度(90%)下显著高于其它郁闭度。露天组以香榧林间栽培黄精抗氧化活性最强,其中清除DPPH自由基(DPPH·)和ABTS自由基(ABTS+·)活性有显著差异。4年生较3年生黄精体外抗氧化活性呈下降趋势,其中总抗氧化活性差异显著,清除DPPH自由基(DPPH·)和ABTS自由基(ABTS+·)活性差异不显著(见图1B)。

    图  1  不同栽培条件和不同年份栽培黄精根茎体外抗氧化活性差异分析($\overline {\mathrm{x}} $±s,n=5)
    注:不同小写字母代表数据间显著性差异(P<0.05)。
    Figure  1.  Analysis on in vitro antioxidant activity of different aged rhizomes of P. cyrtonema cultivated under different forest with different crown density

    图2所示,本研究中郁闭度与新生芽和剥落痕数量呈显著负相关(P<0.01),其中前者相关系数为0.61;海拔和总皂苷含量呈显著正相关(P<0.01),相关系数为0.69。新生芽数与剥落痕数呈显著正相关(P<0.01),两者与鲜、干质量均呈显著正相关(P<0.01),前者相关系数均>0.6。这说明新生芽和剥落痕的数量在一定程度上可以预示多花黄精根茎产量的大小,这与刘跃钧等[17]关于上一年根茎发育形成的有效新芽数量决定新生根茎质量进而影响产量的研究结果相符。郁闭度升高会显著抑制多花黄精增殖生长,新生芽个数和枝条剥落痕数量显著降低,进而影响其产量;高海拔下多花黄精总皂苷的积累呈现出增加的趋势。鲜质量(P<0.05)、干质量(P<0.05,P<0.01)、折干率(P<0.01)与浸出物和多糖含量呈显著正相关,与总酚和总黄酮含量呈显著负相关(P<0.01);浸出物与总酚呈显著负相关(P<0.01),相关系数为−0.69;多糖与总皂苷呈显著正相关(P<0.01),总酚和总黄酮呈极显著正相关(P<0.01),相关系数为0.80,这说明两类活性成分存在协同累积效应。

    图  2  不同生态环境栽培黄精产量和品质特征相关性分析($\overline {\mathrm{x}} $±s,n=5)
    注:YBD—郁闭度,HB—海拔,XSY—新生芽,BLH—剥落痕,XZ—鲜质量,GZ—干质量,ZGL—折干率,JCW—浸出物,DT—黄精多糖,ZZG—总皂苷,ZF—总酚,ZHT—总黄酮。*—P≤0.05 ,**—P≤0.01。
    Figure  2.  Correlation analysis on yield and quality of rhizome of P. cyrtonema cultivated under different forest with different crown density

    浸出物是植物生长期内累积有机物质的总和,浸出物与多糖呈显著正相关(P<0.01),与总酚、总黄酮及体外抗氧化活性间存在显著负相关(P<0.01)(见图3)。多糖与总皂苷呈显著正相关(P<0.01),与总酚(P<0.05)和抗氧化活性(P<0.01)呈显著负相关。说明多糖和浸出物的累积呈协同作用,但与总酚和总黄酮的积累不一致。总皂苷与体外抗氧化活性呈显著正相关(DPPH法P<0.01,ABTS、FRAP法P<0.05),总酚和总黄酮与体外抗氧化活性间呈极显著正相关(P<0.01)。提示总皂苷、总酚和总黄酮是黄精体外抗氧化活性的主要活性成分,其相关系数均>0.7,且总酚对抗氧化活性的贡献度更大。

    图  3  不同生态环境栽培黄精活性成分与体外抗氧化活性相关性分析($\overline {\mathrm{x}} $±s,n=5)
    注:JCW—浸出物,DT—黄精多糖,ZZG—总皂苷,ZF—总酚, ZHT—总黄酮,DPPH—DPPH 自由基清除率,ABTS—ABTS自由基清除率,FRAP—铁还原抗氧化能力。*—P<0.05, **—P<0.01。
    Figure  3.  Correlation analysis on active constituent and in vitro antioxidant activity of rhizome of P. cyrtonema cultivated under different forest with different crown density

    多花黄精对弱光具有较强的适应能力,在透光率极低的林下环境中也能正常生长,顺利开花结果。研究发现多花黄精在郁闭环境中可通过增加株高、叶面积、叶绿素含量等方式捕获光量子,降低气孔密度减少水分蒸腾,提高水分利用率[18]。梁永富等[15]研究发现,随着透光率的增加,多花黄精趋向于拥有更小的单叶面积和更大的叶比重;适度遮阴60%可有效缓解多花黄精叶片的强光伤害,有利于多花黄精的生长,但过度遮阴会促进光合产物向地上部分运输,从而会降低光合产物向根茎的分配比例,使多花黄精根茎产量下降,这与本研究结果相一致。此外,有研究表明适度遮阴促进半夏Pinellia ternata[19]、钩藤Uncaria rhynchophylla[20]等喜阴植物生物量积累,全光照和重度遮阴下显著降低。弱光环境下,多花黄精向茎叶分配的光合产物增多,而向根茎分配的光合产物减少,这可能是多花黄精适应弱光环境的策略,向地上部分分配的光合产物增加可促进茎叶的生长,利于地上部分光合器官的构建,从而获得更多的光能满足其生长[15-16]。植物采取的光响应策略在烟草Nicotiana tabacum[22]、麻栎Quercus acutissima和刺槐Robinia pseudoacacia[23]等研究中也得到验证。

    本研究中低郁闭度(50%)下4年生多花黄精单株干质量可超过100 g,与露天栽培下无显著差异;当郁闭度>70%时单株干质量显著下降,且随郁闭度下降而显著下降;新生芽在一定程度上可以预示黄精产量。研究表明,多花黄精栽培适宜的郁闭度为50%,郁闭度过大将严重影响其形态建成和产量积累。

    本研究中,随着郁闭度的增加,多花黄精浸出物显著下降,黄精多糖和总皂苷含量整体呈现出先升后降的变化趋势;总酚和总黄酮含量则随郁闭度增加而持续增加,均以景宁郁闭度为90%的竹林生境下含量最高,其中总酚含量提升显著,约为低郁闭度下的3.36倍。研究显示在一定范围内,随光照强度的增加西洋参Panax quinquefolius活性成分和三七皂苷含量呈现先增加后降低趋势[24-25],与本研究结果相符。在垂盆草Sedum sarmentosum和鼓槌石斛Dendrobium chrysotoxum研究中同样显示适当遮阴有利于其总酚和总黄酮的积累[21,26],亦与本研究结果相符。此外,大量研究表明黄酮类和酚酸类化合物含量与体外抗氧化活性密切相关或正相关,如洋葱Allium cepa[27]、薄荷Mentha haplocalyx[28]等。本研究中黄精体外抗氧化活性与总皂苷、总酚和总黄酮含量有极显著相关性,其活性随郁闭度增加而显著增强,尤其以郁闭度为90%时抗氧化活性最强。

    本研究发现,露天和低郁闭度(50%)下栽培多花黄精产量高、浸出物和黄精多糖含量较高,中、高郁闭度(70%、90%)下栽培多花黄精总酚和总黄酮含量较高、体外抗氧化活性较强,因此生产中可以对不同生产模式下的黄精进行分类应用。现代药理研究表明,黄精多糖和皂苷在降血糖、抗疲劳、抗衰老、保护心血管和抗肿瘤等方面均有良好活性,在治疗冠心病、糖尿病、低血压等多种病症上有良好应用前景[29-30]。黄精作为药食两用的滋补强壮药,在中国有千年的应用历史,低郁闭度栽培的黄精适于补益方剂等的应用。黄酮类和酚酸类化合物为代表的活性物质与体外抗氧化活性密切相关,近年来研究发现黄精对促进神经细胞、心肌细胞、造血细胞及生殖细胞等损伤的良好修复和再生功能,其作用机制是通过抗氧化、抗自由基等途径来发挥防病治病、延缓衰老的作用[4]。本研究中在极高郁闭度(90%)下总酚和总黄酮含量及体外抗氧化活性均得以大幅提升,提示高郁闭度栽培多花黄精可应用于心血管保护和抗氧化等方面的研发应用。

    本研究郁闭度对不同林分栽培多花黄精的产量和活性成分含量影响最为显著,其中低郁闭度(50%)栽培的多花黄精干物质积累充足,单株干质量与露天栽培无显著差异,且多糖和浸出物积累充足发现栽培年限对多花黄精产量影响显著,4年生较3年生根茎同比增产达150%以上;高郁闭度(≥70%)栽培的多花黄精产量显著下降,但药材总皂苷、总黄酮和多酚含量相对提高,同时抗氧化活性也显著提高。针对不同生产模式下所产黄精药材特性的不同,认为郁闭度较林分对黄精产量和品质产生更为显著的影响,建议以实际生产中林分郁闭度作为黄精分类应用的重要依据,如低郁闭度林下栽培的黄精适于开发补益方剂等的应用,高郁闭度林下栽培的黄精可应用于心血管保护和抗氧化剂等方面的应用。

  • 图  1   不同栽培条件和不同年份栽培黄精根茎体外抗氧化活性差异分析($\overline {\mathrm{x}} $±s,n=5)

    注:不同小写字母代表数据间显著性差异(P<0.05)。

    Figure  1.   Analysis on in vitro antioxidant activity of different aged rhizomes of P. cyrtonema cultivated under different forest with different crown density

    图  2   不同生态环境栽培黄精产量和品质特征相关性分析($\overline {\mathrm{x}} $±s,n=5)

    注:YBD—郁闭度,HB—海拔,XSY—新生芽,BLH—剥落痕,XZ—鲜质量,GZ—干质量,ZGL—折干率,JCW—浸出物,DT—黄精多糖,ZZG—总皂苷,ZF—总酚,ZHT—总黄酮。*—P≤0.05 ,**—P≤0.01。

    Figure  2.   Correlation analysis on yield and quality of rhizome of P. cyrtonema cultivated under different forest with different crown density

    图  3   不同生态环境栽培黄精活性成分与体外抗氧化活性相关性分析($\overline {\mathrm{x}} $±s,n=5)

    注:JCW—浸出物,DT—黄精多糖,ZZG—总皂苷,ZF—总酚, ZHT—总黄酮,DPPH—DPPH 自由基清除率,ABTS—ABTS自由基清除率,FRAP—铁还原抗氧化能力。*—P<0.05, **—P<0.01。

    Figure  3.   Correlation analysis on active constituent and in vitro antioxidant activity of rhizome of P. cyrtonema cultivated under different forest with different crown density

    表  1   黄精样品信息

    Table  1   Location of sample plots

    编号 样品名称 样品详情 郁闭度/% 经度/E 纬度/N 海拔/m
    1 3-SY-TD 0 松阳-田地-3年 0 119°32′19″ 27°49′49″ 788
    2 4-SY-TD 0 松阳-田地-4年 0
    3 3-SY-ZL 0.7 松阳-毛竹林-3年 70 118°29′6″ 28°21′57″ 447
    4 4-SY-ZL-0.7 松阳-毛竹林-4年 70
    5 3-SY-SM 0.5 松阳-杉木-3年 50 119°34′13.41″ 28°31′49.47″ 903
    6 4-SY-SM 0.5 松阳-杉木-4年 50
    7 4-SY-SM 0.7 松阳-杉木-4年 70
    8 4-JN-TD 0 景宁-田地- 4年 0 119°32′21.7032 27°48′49.572″ 820
    9 4-JN-XF 0 景宁-香榧- 4年 0 119°42′7.4″ 27°49′39.57″ 998
    10 4-JN-ZL 0.7 景宁-竹林- 4年 70 119°39′34.54″ 27°49′22.8″ 820
    11 4-JN-ZL 0.9 景宁-竹林- 4年 90
      注:数字“3、4”代表栽培年限,SY为松阳,JN为景宁;TD为田地,ZL为竹林,SM为杉木,XF为香榧。下同。
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    表  2   不同郁闭度、不同林分栽培黄精根茎表型和产量特征差异分析($\overline {\mathrm{x}} $±s,n=5)

    Table  2   Phenotype and yield of P. cyrtonema rhizome cultivated under different forest with different crown density

    组别 样品编号 新生芽/个 剥落痕/个 鲜质量/g 干质量/g 折干率/%
    露天组 4-SY-TD 0 10.25±2.06a 9.00±2.31a 498.00±34.13ab 110.97±4.36ab 22.32±0.69b
    4-JN-TD 0 10.75±1.50a 8.00±2.83ab 611.63±190.30a 138.28±45.61a 22.52±0.66ab
    4-JN-XF 0 8.50±3.11ab 7.00±0.82ab 600.50±71.39a 137.77±21.89a 22.90±2.05ab
    低郁闭度 4-SY-SM 0.5 6.50±1.00bc 7.00±0.82ab 459.50±43.09bc 112.52±12.06ab 24.47±0.46a
    中郁闭度 4-SY-SM 0.7 5.25±0.96cd 6.75±0.96ab 394.50±44.72bc 87.10±12.02bc 22.13±2.17b
    4-SY-ZL 0.7 3.75±0.96d 5.75±0.96b 370.75±50.72bc 82.36±12.73bc 22.19±1.12b
    4-JN-ZL 0.7 3.50±0.58d 7.50±1.91ab 381.25±62.37bc 83.92±14.01bc 22.02±0.83b
    高郁闭度 4-JN-ZL 0.9 3.50±0.58d 7.75±2.06ab 356.00±66.85c 59.47±9.97c 16.81±1.29c
      注:同列不同小写字母代表数据间显著性差异(P<0.05)。下同。
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    表  3   不同年份栽培黄精根茎表型和产量特征差异分析($\overline {\mathrm{x}} $±s,n=5)

    Table  3   Phenotype and yield of different aged P. cyrtonema rhizome cultivated under different forest with different crown density

    组分 样品编号 新生芽/个 剥落痕/个 鲜质量/g 干质量/g 同比增加/% 折干率/%
    露天组 3-SY-TD 8.75±1.50a 8.50±0.58ab 219.38±22.48c 44.00±3.33c 20.11±0.78c
    4-SY-TD 10.25±2.06a 9.00±2.31a 498.00±34.13a 110.97±4.36a 152.20 22.32±0.69b
    低郁闭度
    杉木林组
    3-SY-SM 0.5 3.25±0.50c 5.00±1.41c 148.00±14.04d 33.76±4.35cd 22.77±1.10b
    4-SY-SM 0.5 6.50±1.00b 7.00±0.82abc 459.50±43.09a 112.52±12.06a 233.31 24.47±0.46a
    中郁闭度
    竹林组
    3-SY-ZL 0.7 2.50±0.58c 6.75±0.96bc 133.75±24.13d 27.39±4.10d 20.60±1.68c
    4-SY-ZL 0.7 3.75±0.96c 5.75±0.96c 370.75±50.72b 82.36±12.73b 200.70 22.19±1.12b
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    表  4   不同郁闭度、不同林分栽培黄精根茎活性成分含量差异分析($\overline {\mathrm{x}} $±s,n=5)

    Table  4   Analysis of differences of active constituent content in rhizome of P. cyrtonema cultivated under different forest with different crown density

    组别 样品编号 浸出物/% 多糖/% 总皂苷/(mg·g−1) 总酚/(mg·g−1) 总黄酮/(mg·g−1)
    露天组 4-SY-TD 0 80.83±2.19c 13.18±0.31c 55.34±0.18cd 0.94±0.17c 0.18±0.05d
    4-JN-TD 0 77.46±0.46d 13.63±0.32c 49.50±0.66d 0.95±0.36c 0.23±0.03cd
    4-JN-XF 0 82.43±2.29bc 11.39±0.23c 100.32±13.17a 1.19±0.02b 0.28±0.06c
    低郁闭度 4-SY-SM 0.5 83.00±1.47ab 12.31±0.04b 48.61±0.52d 0.94±0.02c 0.23±0.01cd
    中郁闭度 4-SY-SM 0.7 78.54±0.71d 14.12±0.24b 50.75±5.27d 1.22±0.02b 0.27±0.06c
    4-SY-ZL 0.7 84.89±1.05a 14.85±0.64a 44.70±1.60d 0.90±0.07c 0.24±0.01c
    4-JN-ZL 0.7 77.32±3.28d 13.18±0.31c 75.07±1.66b 1.19±0.30b 0.40±0.02b
    高郁闭度 4-JN-ZL 0.9 72.30±1.25f 13.63±0.32c 66.24±7.79bc 2.84±0.06a 0.49±0.05a
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    表  5   不同年份栽培黄精根茎活性成分含量差异分析($\overline {\mathrm{x}} $±s,n=5)

    Table  5   Active constituent content in different aged rhizome of P. cyrtonema cultivated under different forest with different crown density

    组别 样品编号 浸出物/% 多糖/% 总皂苷/(mg·g−1) 总酚/(mg·g−1) 总黄酮/(mg·g−1)
    露天组 3-SY-TD 0 79.66±3.69c 13.18±0.31c 44.27±0.42c 1.10±0.04a 0.24±0.06a
    4-SY-TD 0 80.83±2.19bc 13.63±0.32c 55.34±0.18a 0.94±0.17b 0.18±0.05b
    低郁闭度杉木林组 3-SY-SM 0.5 79.34±1.90c 13.39±0.23c 55.88±2.62a 0.94±0.01b 0.20±0.03ab
    4-SY-SM 0.5 83.00±1.47ab 14.32±0.05b 48.61±0.52b 0.94±0.02b 0.23±0.01a
    中郁闭度竹林组 3-SY-ZL 0.7 83.50±0.44ab 14.12±0.24b 47.77±1.14b 0.91±0.01b 0.24±0.01a
      4-SY-ZL 0.7 84.89±1.05a 14.85±0.64a 44.70±1.60c 0.90±0.07b 0.24±0.01a
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图(3)  /  表(5)
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出版历程
  • 收稿日期:  2024-01-04
  • 修回日期:  2024-06-16
  • 刊出日期:  2024-08-22

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